13个甘蓝型油菜GPATs编码基因的酵母遗传互补功能鉴定

• 作者: 丁硕 刘宏波 林怡馨 段芊芊 甘毅 郑月萍 魏琳燕
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蓝型油菜 3-磷酸甘油酰基转移酶(GPAT) 酵母遗传互补
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1156-1164
• 页数: 9页
• 分类号: S312
• 字数: 5057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.07.002

摘要

3-磷酸甘油酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransferases,GPAT)是催化植物甘油脂从头合成第1步酰化反应的限速酶.分离和鉴定甘蓝型油菜(Brasscia napus)的GPAT编码基因将有助于深入解析种子中甘油脂的合成代谢机制.本研究通过反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)扩增获得13个甘蓝型油菜中具有酰基转移酶保守结构域的候选编码基因,构建至酵母(Saccharomyces cerevisiae)异源表达载体yADH1-pYES2-Kan V2(外源基因表达受葡萄糖诱导,受半乳糖抑制).重组酵母表达载体酶切和测序验证结果显示,克隆的13个基因片段大小和序列与预期相符;通过氨基酸序列比对分析,发现克隆基因编码的氨基酸序列分别含有1～2个跨膜结构域和4个酰基转移酶保守序列.进一步利用本实验室创建的高效条件致死型酵母双敲除突变体菌株ZAFU1筛选体系(BY4742,gat1Δgat2Δ+[pGAL1::AtGPAT1 LEU2])进行遗传互补验证,结果显示,在葡萄糖诱导条件下,BnGPAT1-1、BnGPAT4-1、BnGPAT4-2和BnGPAT9-1基因的异源表达能恢复ZAFU1的生长,表明其具有类似酵母酰基转移酶编码基因YKR067w(命名为GAT1)的功能.本研究结果可为甘蓝型油菜含油量的遗传改良提供参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	甘毅	浙江农林大学农业与食品科学学院	7	3	1.0	1.0
2	郑月萍	浙江农林大学农业与食品科学学院	2	0	0.0	0.0
3	段芊芊	浙江农林大学农业与食品科学学院	2	0	0.0	0.0
4	林怡馨	浙江农林大学农业与食品科学学院	1	0	0.0	0.0
5	丁硕	浙江农林大学林业与生物技术学院	1	0	0.0	0.0
6	魏琳燕	浙江农林大学农业与食品科学学院	1	0	0.0	0.0
7	刘宏波	浙江农林大学农业与食品科学学院	5	4	2.0	2.0