抗犬细小病毒VP2蛋白单链抗体的制备与中和活性研究

• 作者: 刘明 宋彩玲 李彤彤 杨凯越 王文静 陈慧宇
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬细小病毒 单链抗体 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 10-16
• 页数: 7页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.1910026

摘要

为了减轻鼠源单克隆抗体(McAb)异源性引起的宿主免疫排斥反应,同时克服生产McAb成本高及费时费力等缺点,利用原核表达制备具有抗犬细小病毒(CPV)鼠源抗体可变区基因的单链抗体(single chain antibody fragment,ScFv).提取实验室前期制备筛选的分泌具有良好中和活性抗CPV VP2蛋白McAb的杂交瘤细胞株总RNA,从反转录cDNA中扩增抗体重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因并克隆到表达载体中,构建重组质粒pOPE101-ScFv;将重组质粒转化大肠杆菌进行诱导表达,通过蛋白免疫印迹(Western blot)实验、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)证明,利用大肠杆菌表达系统获得的ScFv具有和CPV特异性结合的能力,且具有中和活性,效价为1:20(0.028μg/ml),为CPV的临床免疫治疗提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘明	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	73	734	12.0	25.0
2	王文静	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	9	18	2.0	4.0
3	李彤彤	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
4	宋彩玲	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	2	3	1.0	1.0
5	杨凯越	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	陈慧宇	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0