异柠檬酸脱氢酶1与突变体重组慢病毒的制备及表达

• 作者: 单德志 张弛 曹相玫
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 异柠檬酸脱氢酶1 胶质瘤 重组慢病毒
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 200-206
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2020.02.014

摘要

目的:制备异柠檬酸脱氢酶1野生型(IDH1)和R132H突变型(mutIDH1)基因重组慢病毒,感染人胶质瘤来源的细胞系U87细胞并观察目的基因的表达.方法:利用基因克隆技术构建IDH1和mutIDH1基因重组慢病毒载体pLVX-IDH1-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro和pLVX-mutIDH1-mCMV-ZsGreen-PGK-Puro,转染293T细胞,进行慢病毒包装,获得慢病毒颗粒;慢病毒颗粒感染HEK293细胞,采用逐孔稀释滴度测定法测慢病毒滴度;IDH1和mutIDH1基因重组慢病毒感染U87细胞,观察感染效率,Western Blot检测IDH1和mutIDH1基因在U87细胞的表达.结果:成功制备IDH1和mutIDH1基因重组慢病毒颗粒,病毒滴度均为1.0×10s TU/ml;感染U87细胞,Western Blot结果显示:IDH1组中IDH1蛋白水平高于mutIDH1组和空载体对照组;mutIDH1组中mu-tIDH1蛋白条带清晰,表达量高,IDH1组和对照组均不表达mutIDH1蛋白.结论:成功制备IDH1和mutIDH1基因重组慢病毒,感染U87细胞后能使目的基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单德志	宁夏医科大学基础医学院病理学系	2	1	1.0	1.0
3	曹相玫	宁夏医科大学基础医学院病理学系	29	51	4.0	6.0
4	张弛	宁夏医科大学临床医学院	2	0	0.0	0.0