伪狂犬病病毒gE/gI基因在昆虫细胞中的表达及鉴定

• 作者: 何勇 刘佳 孙国鹏 岳锋 张强 张艳芳 朱艳平 李鹏 王选年 申一兰 邢瑞林
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病病毒 gE/gI基因 杆状病毒系统表达
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 25-29
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 4557字
• 语种: 中文

摘要

为获得具有生物活性的伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)gE/gI蛋白,建立PRV抗体快速检测方法.将含有PRV gE、gI基因的质粒pFastBacdual-GP67-gE/gI转化至宿主菌,经位点特异性重组和蓝白斑筛选后获得重组杆粒rBacmid-gE/gI,转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.采用悬浮的Sf9细胞进行发酵并纯化产物,SDS-PAGE和Western blot分析镍柱纯化后的重组蛋白.结果显示,重组杆粒在4800 bp处克隆出预期大小的条带,表示重组杆粒构建成功.SDS-PAGE和Western blot表明,在50 ku和65 ku处出现预期大小的条带,能与PRV标准阳性血清特异性反应,不与PRV gE/gI缺失疫苗免疫血清反应.结果表明gE/gI重组蛋白具有良好的反应原性,为PRV抗体快速检测及区分PRV野毒感染和疫苗免疫奠定了基础.