应用UPLC-QTOF-MS/MS技术测定肝细胞癌患者血清代谢组

• 作者: 王淑凤 柏兆方 杨馨 王心正 何昆 王红霞
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 关键词: 肝癌 血清 超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术 代谢组
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 918-929
• 页数: 12页
• 分类号: R965|R730.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.12.004

摘要

目的 通过比较肝细胞癌(HCC)和肝硬化(LC)患者血清代谢物,研究HCC代谢谱变化,为寻找HCC早期诊断标志物及治疗新靶点和策略提供依据.方法 收集HCC和LC患者血清各50例,应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-QTOF-MS/MS)对血清代谢物进行鉴定和定量.液相色谱分离采用反相色谱(RPLC)和亲水色谱(HILIC)2种模式,质谱采集包括正、负2种离子化方式.应用Progen?esis QI软件进行数据处理,应用EZinfo软件进行主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计分析并筛选差异代谢物.代谢物鉴定通过检索人代谢组数据库(HMDB)和Metlin数据库实现.应用MetaboAna?lyst 4.0对差异代谢物进行代谢通路分析.结果 应用UPLC-QTOF-MS/MS技术,共检测到87610个特征代谢峰,鉴定出7848种代谢物.通过P<0.05,变量重要性投影指标(VIP)值≥1及HCC与LC比较的差异倍数≥1.5或≤0.67等3个条件筛选出差异代谢物438个,主要包括磷脂、胆汁酸、游离脂肪酸、小肽和氨基酸等,涉及12个代谢通路的变化.结论 与LC患者比较,HCC患者的血清代谢组发生显著变化,共有438种差异代谢物参与12个代谢通路的变化,这有助于发现早期诊断标志物和药物靶标.其中50个差异代谢物具有较高的临床诊断价值,值得进一步验证.另外,本研究近8000个代谢物的鉴定表明,所采用的RPLC结合HILIC分离的UPLC-QTOF-MS/MS技术显著提高了代谢物的鉴定覆盖率,可广泛应用于多领域的代谢组学研究.