双链探针实时荧光PCR核酸检测新技术研究

• 作者: 刘丽艳 刘琪琦 张影 王升启
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 双链探针 TaaMan探针 实时荧光PCR 乙肝病毒 CYP2C19*2
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 28-34
• 页数: 7页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.2008124

摘要

目的:采用一种"双链探针"实时荧光PCR技术,提高HBV核酸检测灵敏度,并在同一反应管中实现代谢酶CYP2C19*2基因型检测.方法:采用双链探针与TaqMan探针同时检测不同浓度HBV血清样本,使用上海宏石SLAN 96实时荧光PCR仪进行核酸Ct值检测和结果统计分析;采用双链探针检测代谢酶CYP2C19*2不同基因型样本,使用上海宏石SLAN 96实时荧光PCR仪进行核酸Ct值检测和基因型确定.结果:不同浓度HBV血清样本检测,双链探针荧光本底低,检测灵敏度更高,与TaqMan探针检测结果相比,两者核酸检测Ct值存在显著性差异(P<0.05);双链探针检测36份样本的代谢酶CYP2C19.2基因型,检测结果与Sanger测序结果完全一致.结论:双链探针实时荧光PCR检测技术可完成目的基因的高灵敏核酸检测,也可实现基因型分析.