毛果杨苯丙氨酸解氨酶活性比较及肉桂酸制备

• 作者: 张晨 欧阳嘉 臧颖 许倩 郑兆娟
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 毛果杨 苯丙氨酸解氨酶 酶学性质 肉桂酸 原核表达
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 97-104
• 页数: 8页
• 分类号: Q814.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201901018

摘要

[目的]苯丙氨酸解氨酶(PAL)在苯丙烷代谢途径中具有重要作用,PtrPAL基因的挖掘、酶学性质分析和应用为毛果杨苯丙烷代谢途径的研究和肉桂酸(t-ca)合成提供参考.[方法]基于基因组注释信息,挖掘毛果杨PtrPAL基因,进行原核表达和酶学性质分析.以L-苯丙氨酸(L-Phe)为底物,通过全细胞催化合成t-ca.[结果]通过挖掘毛果杨基因组得到了5个PtrPAL基因,系统发育树分析表明其在进化上分为两组.PtrPAL3和Ptr-PAL4来自不同进化分支,选取其进行原核表达和酶学性质分析.镍柱纯化后的重组蛋白rePtrPAL3和rePtrPAL4最适温度分别是55℃和60℃,最适pH分别是8.5和8.0,比酶活分别为3.363和3.381 U/mg,且均具有微弱的酪氨酸解氨酶活力.重组蛋白的动力学分析表明,rePtrPAL3对L-Phe的亲和力更高.将rePtrPAL3应用于L-Phe脱氨生产t-ca,全细胞催化7h可产生104 mmol/L t-ca.[结论]具有不同转录特异性的两种rePtrPAL酶学性质接近,但rePtrPAL3表现出更高的催化效率,更适合用于t-ca的生物合成.而且,其产量高于文献报道的28 mmol/L水平,具有良好的应用潜力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑兆娟	南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心	15	69	5.0	8.0
5	张晨	南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心	8	3	1.0	1.0
9	臧颖	南京林业大学林学院	4	20	2.0	4.0
10	许倩	南京林业大学江苏省林业资源高效加工利用协同创新中心	2	0	0.0	0.0