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肝靶向肽修饰的人内皮抑制素rES-CSP融合蛋白可溶性表达及活性鉴定
肝靶向肽修饰的人内皮抑制素rES-CSP融合蛋白可溶性表达及活性鉴定
作者:
余田甜
张晶晶
汪洁
许敏华
金小宝
马艳
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
可溶性表达
肝靶向肽修饰的人内皮抑制rES-CSP
活性鉴定
摘要:
为了方便获得大量的有活性rES-CSP融合蛋白,通过优化诱导表达条件,实现融合蛋白rES-CSP的可溶性表达,并纯化后检测其生物学活性,使该融合蛋白作为药用蛋白大规模生产成为可能.首先在常规条件下诱导表达融合蛋白rES-CSP,通过SDS-PAGE电泳分析,选出最优菌株;继而优化诱导温度和诱导时间,Western Blot检测目的 蛋白可溶性表达情况,Ni-NTA亲和层析柱进行纯化后RP-HPLC分析其纯度;CCK-8细胞增殖实验和流式细胞仪检测融合蛋白生物学活性.结果 选出目的 蛋白约占菌体总蛋白43.84%的单克隆菌株为研究对象,在诱导温度为25℃,诱导时间为20 h时,融合蛋白rES-CSP实现可溶性表达,并且可溶性表达量较高.经纯化后获得的rES-CSP融合蛋白纯度达到98%以上;制备的rES-CSP融合蛋白具有抑制肝癌细胞HepG2增殖作用,且与HepG2结合能力较强;为融合蛋白rES-CSP的应用研究奠定基础.
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篇名
肝靶向肽修饰的人内皮抑制素rES-CSP融合蛋白可溶性表达及活性鉴定
来源期刊
生物学杂志
学科
生物学
关键词
可溶性表达
肝靶向肽修饰的人内皮抑制rES-CSP
活性鉴定
年,卷(期)
2020,(5)
所属期刊栏目
研究报告
研究方向
页码范围
15-18
页数
4页
分类号
Q78
字数
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.2095-1736.2020.05.015
五维指标
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可溶性表达
肝靶向肽修饰的人内皮抑制rES-CSP
活性鉴定
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
生物学杂志
主办单位:
合肥市科学技术协会
出版周期:
双月刊
ISSN:
2095-1736
CN:
34-1081/Q
开本:
大16开
出版地:
安徽省合肥市花园街83号合肥大厦9楼
邮发代号:
26-50
创刊时间:
1983
语种:
chi
出版文献量(篇)
3549
总下载数(次)
14
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