南瓜籽 ACE 抑制肽的 Plastein 反应修饰及分离鉴定

• 作者: 胡田媛 杨晨 陈哲 郑竟成 何东平 杨永 雷芬芬
• 来源期刊: 中国油脂
• 关键词: 南瓜籽 ACE抑制肽 Plastein反应 分离鉴定
• 年，卷（期）: 2023,（2）
• 所属期刊栏目: 油料蛋白
• 页码范围: 38-44
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19902/j.cnki.zgyz.1003-7969.210722

摘要

为进一步提升南瓜籽多肽的ACE抑制活性，利用Plastein反应对南瓜籽ACE抑制肽进行修饰，探究底物质量分数、反应温度、反应时间以及3种外源氨基酸添加量对ACE抑制率的影响。采用超滤和Sephadex G-25柱层析等分离修饰产物，并利用LC-MS/MS鉴定肽序列。结果表明：Plastein反应修饰的最佳条件为底物质量分数45%,反应温度20℃,反应时间3 h;分别添加亮氨酸、苯丙氨酸或甘氨酸均能显著提升修饰产物的ACE抑制率，其中添加0.5 mmol/g亮氨酸时，修饰产物的ACE抑制率最高，比修饰前提高了24.50百分点；经超滤和Sephadex G-25柱层析分离，获得ACE抑制率达89.61%的组分，经LC-MS/MS鉴定出76个肽段，固相合成其中4种多肽IFH、IFF、LAAF、DFHPR,其抑制ACE的IC50分别为1.55、2.24、3.79 mmol/L和7.86 mmol/L。综上，Plastein反应修饰可显著改善南瓜籽ACE抑制肽的ACE抑制活性，经超滤和Sephadex G-25柱层析分离，可获得高ACE抑制活性的南瓜籽ACE抑制肽。