水产品中食源性病原菌多重PCR快速检测方法的建立

• 作者: 刘晓蓉 李明成 母润红 聂丹丹 赵明 马丽 高丽君
• 来源期刊: 北华大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 多重PCR 快速检测 沙门氏菌 单核细胞增生李斯特菌 副溶血性弧菌 霍乱弧菌
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: ·生物科学·基础医学
• 页码范围: 756-760
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11713/j.issn.1009-4822.2020.06.012

摘要

目的 建立一种同时鉴定沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的多重PCR快速检测技术,为水产品中食源性病原菌检测提供新思路.方法 基于沙门氏菌invA基因、单核细胞增生李斯特菌prfA、副溶血性弧菌tlh和霍乱弧菌ompW4靶基因保守序列设计特异性引物,进行单重PCR扩增和敏感性试验;优化多重PCR反应体系中退火温度,进行多重PCR特异性、敏感性和人工添加目的菌污染鱿鱼检测试验;建立多重PCR检测技术.结果 建立优化后的多重PCR对4种目标菌的单一或混合基因组DNA进行特异性扩增,而非目标菌金黄色葡萄球菌、猪霍乱沙门氏菌、普通变形杆菌、小肠耶尔森菌、大肠埃希氏菌、克雷伯氏菌、粪肠球菌、蜡样芽孢杆菌、志贺氏菌、阴沟肠杆菌等其他菌株的基因组DNA均未见任何条带;沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌和霍乱弧菌的最低检出限为104 cfu/mL,副溶血性弧菌最低检出限为107 cfu/mL.应用多重PCR对人工添加目标菌和非目标菌的鱿鱼进行检测,其结果可信.结论 本研究建立沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌的多重PCR检测,具有快速、简便、灵敏、准确等优点,可为水产品食源性病原菌检测及其防疫检疫检验部门提供一种高效、准确的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明成		75	244	7.0	12.0
2	赵明		15	62	4.0	7.0
3	高丽君		24	57	4.0	6.0
4	母润红		10	10	2.0	2.0
5	马丽		10	6	1.0	2.0
6	聂丹丹		1	0	0.0	0.0
7	刘晓蓉		1	0	0.0	0.0