过表达KAR2基因对毕赤酵母产米黑根毛霉脂肪酶的影响

• 作者: 孙梦雪 张恺倪 张馨 王一洲 赵庆伊 黄金金
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 米黑根毛霉脂肪酶 KAR2 过表达 毕赤酵母 UPR
• 年，卷（期）: 2020,（14）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 103-107
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 5082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2020.14.028

摘要

Kar2p是分子伴侣蛋白,可与新生肽结合,促进新生肽进入内质网.为研究其对米黑根毛霉脂肪酶(RML)在毕赤酵母中表达的影响,通过PCR方法从毕赤酵母菌株中克隆到KAR2基因,并用毕赤酵母胞内表达载体pPIC3.5K构建过表达质粒KAR2-pPIC3.5K.用电转化的方法,将KAR2-pPIC3.5K二次转化到含4-拷贝rml基因的毕赤酵母重组菌株4pRML-X33中,获得能同时过表达RML和KAR2p的二次转化子4pRML-X33-KAR2.摇瓶发酵发现,过表达KAR2基因对菌株生长无明显影响,但RML胞外酶活降低.采用RT-qPCR方法分析菌中rml及UPR相关基因的转录水平,发现KAR2基因转录水平上调了3.7倍,虽然仅引起与UPR相关的HAC1基因转录水平的下调,但却使rml的表达下调43％.说明KAR2过表达导致RML产量降低是降低了rml的mRNA量,而不是增加内质网中蛋白折叠的压力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄金金	江苏师范大学药用植物生物技术实验室生命科学学院	2	0	0.0	0.0
2	孙梦雪	江苏师范大学药用植物生物技术实验室生命科学学院	1	0	0.0	0.0
3	王一洲	江苏师范大学药用植物生物技术实验室生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	赵庆伊	江苏师范大学药用植物生物技术实验室生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	张馨	江苏师范大学药用植物生物技术实验室生命科学学院	1	0	0.0	0.0
6	张恺倪	江苏师范大学药用植物生物技术实验室生命科学学院	1	0	0.0	0.0