米黑根毛霉脂肪酶基因密码子优化及重叠延伸PCR合成

• 作者: 吕鹏梅 李惠文 杨玲梅 罗文 苗长林 袁振宏
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 米黑根毛霉脂肪酶 密码子优化 重叠延伸PCR 克隆
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 47-48,112
• 页数: 3页
• 分类号: S188|Q814
• 字数: 2612字
• 语种: 中文

摘要

[目的]对米黑根毛霉脂肪酶基因的密码子进行优化,并采用重叠延伸PCR合成设计的基因序列.[方法]根据毕赤酵母(Pichia astoris)密码子使用偏好性,对米黑根毛霉脂肪酶成熟肽基因进行全面密码子优化,根据优化后的氨基酸编码序列设计合成30条长度约为48bp的寡核苷酸片段,并采用重叠延伸PCR法扩增合成全长基因序列.[结果]经凝胶电泳和酶切鉴定、测序分析表明,合成的目的基因与设计的序列相一致.[结论]该研究为脂肪酶基因在毕赤酵母中的构建及后续表达奠定了基础.