酶及寡聚化结构域影响类弹性蛋白多肽相变的规律及机制

• 作者: 葛慧华 王心哲 邱岳 张光亚
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 关键词: 蛋白寡聚化 相变温度 类弹性蛋白多肽 重组蛋白纯化 Hofmeister离子序
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 页码范围: 1534-1539
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19675/j.cnki.1006-687x.2019.10045

摘要

了解外源酶对类弹性蛋白多肽(ELPs)相变温度及聚集所形成颗粒粒径大小及分布的规律,有助于高效利用非色谱纯化技术实现目标酶分离纯化,也为选择孔径合适的分离膜构建酶膜反应器提供依据.以ELPs40、寡聚化ELPs40(E-F)、寡聚化及线性的地衣多糖酶(B-E-F、B-E)和木聚糖酶(X-E-F、X-E)为研究对象,考察外源酶对ELPs40相变温度的影响.结果显示,引入地衣多糖酶及木聚糖酶分别将ELPs的相变温度提高了11 ℃和13 ℃;而寡聚化结构域Foldon却使B-E-F及X-E-F相变温度分别降低了8℃和11℃.此外,探究了NaCI、Na2SO4及Na2CO3对上述融合蛋白中ELPs相变温度的影响.结果显示,B-E-F在0.1-0.3 mol/L Na2CO3溶液中未发生相变,而在等浓度的Na2SO4溶液中则发生了明显相变,这一现象明显不符合Hofmeister离子序,这可能与地衣多糖酶和Foldon较低的等电点有关.