杆状病毒核心基因ac78的克隆、表达与活性研究

• 作者: 刘文华 李赛男 杨永盼 赵海洲 钟佩桥
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 杆状病毒 ac78 克隆 原核表达 活性测定
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 药学·生物工程
• 页码范围: 210-215
• 页数: 6页
• 分类号: S476.13
• 字数: 3910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2020.06.031

摘要

杆状病毒核心基因ac78在杆状病毒的生活周期中具有重要作用.生物信息学分析发现,Ac78与斯氏假单胞菌的细胞色素C氧化酶cbb3-型亚基III具有一定的序列一致性,表明Ac78可能具有氧化酶活性,并在氧化还原反应中具有一定功能.用PCR的方法成功扩增得到ac78基因,该基因序列与GenBank上的苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)ac78基因的核苷酸同源性100％,将其克隆至原核表达载体pQE30,构建了ac78基因原核表达质粒,转化大肠杆菌M15[pREP4],在1 mmol/L IPTG和低温诱导下超量表达了可溶性的目的蛋白.使用Ni-NTA Resin蛋白纯化树脂获得了较纯的含有6×His接头的Ac78蛋白,使用纯化细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒测定其细胞色素C氧化酶活性,结果为阴性,表明Ac78可能不具有细胞色素C氧化酶活性.上述研究结果为深入探究Ac78的作用机理打下了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李赛男	肇庆学院生命科学学院	16	20	3.0	4.0
2	赵海洲	肇庆学院生命科学学院	8	12	2.0	3.0
3	刘文华	肇庆学院生命科学学院	18	15	2.0	3.0
4	钟佩桥	肇庆学院生命科学学院	2	0	0.0	0.0
5	杨永盼	肇庆学院生命科学学院	1	0	0.0	0.0