小麦Pinb基因启动子区CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建

• 作者: 宋国琦 张淑娟 张荣志 李根英 李玉莲 李玮 高世庆 高洁
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 CRISPR/Cas9 基因编辑 Pinb基因
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术·遗传育种·种质资源
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 分类号: S512.103.53|Q782
• 字数: 5083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2020.01.001

摘要

CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术已经逐渐成熟并在多种植物中得到成功应用,促进了基因功能的研究.小麦籽粒硬度是决定小麦加工品质的重要性状,Pinb是控制籽粒硬度的关键基因之一.本研究以小麦Pinb基因为对象,联合采用常规PCR和Golden Gate cloning技术,构建了包含小麦Pinb基因启动子区双靶点的CRISPR/Cas9基因编辑载体.将重组载体转入小麦原生质体中进行sgRNA活性的检测,在两个靶点位置均发生了突变,编辑效率分别为4.57％和4.37％,基因编辑类型包括碱基替换和碱基缺失.该研究为在小麦中实现Pinb基因的定点突变奠定了基础,对其功能研究和小麦品质改良均具有重要意义.