PRRSV GP5多表位融合基因的生物信息学分析及真核表达载体的构建

• 作者: 何敬文 姚景丽 李丹 武静桥 王小月 范真玮 蓝肇煜 赵微 金天明 陈婷
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PRRSV GP5 表位疫苗 重组质粒
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1893-1899
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.10.01

摘要

为构建一种安全、有效的猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)多表位基因融合疫苗,通过对5株美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)毒株JL580、HENAN、VR2332、NADC30、JXA1的GP5蛋白序列进行同源性分析,并对其保守区进行T细胞和B细胞表位预测;将预测获得的序列进行连接、重组得到GP5多表位融合基因(GP5 recombinant epitopes sequence,GRE),利用生物信息学软件分析GRE序列的二级结构、亲水性及跨膜区;分别将GP5和GRE基因构建至真核表达载体pEGFP-N1,并将上述构建成功的无内毒素重组质粒转染至Marc145细胞,RT-PCR分析其表达情况,CCK-8检测其对细胞增殖率的影响.结果 显示,GRE序列二级结构较稳定,亲水性较好,存在2个跨膜区域;分别获得了真核表达载体pEGFP-GP5和pEGFP-GRE,且RT-PCR证明重组质粒在Marc145细胞中能够转录目的基因;经CCK-8检测,重组质粒对真核细胞的增殖无显著性影响.结果 表明,试验成功组建GRE序列并构建了其真核表达载体,且GP5和GRE的表达时真核细胞均无明显毒性作用.本试验为PRRS多表位疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈婷		3	1	1.0	1.0
2	金天明		74	139	6.0	9.0
3	李丹		9	47	2.0	6.0
4	蓝肇煜		7	0	0.0	0.0
5	王小月		6	0	0.0	0.0
6	武静桥		2	0	0.0	0.0
7	范真玮		2	0	0.0	0.0
8	姚景丽		2	0	0.0	0.0
9	何敬文		2	0	0.0	0.0
10	赵微		2	0	0.0	0.0