副溶血性弧菌质粒DNA参考物质的研制

• 作者: 努色热提·阿布都沙拉木 林晓峰 袁暮云 许龙岩 陈瑶
• 来源期刊: 分子诊断与治疗杂志
• 关键词: 副溶血性弧菌 质粒DNA参考物质 实时荧光定量聚合酶链式
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1474-1478
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 研制一种质粒DNA参考物质,包含副溶血性弧菌检测常用的目的靶基因——耐热直接溶血素(tdh)、不耐热直接溶血素(tlh)、和耐热相关溶血素(trh)、跨膜转录激活蛋白(toxR)基因序列,为副溶血性弧菌病原体的快速鉴定提供相关技术支持.方法 使用人工DNA合成技术合成所需目的基因,构建重组质粒,并对其纯度、均匀性、稳定性、标准值、不确定度及在实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)中的应用进行评价.结果 质粒DNA参考物质的纯度高,均匀性、稳定性良好,可用于检测副溶血性弧菌的的荧光定量PCR检验,与传统的基因组核酸参考品有可比性.结论 该质粒DNA参考物质适用于以tdh、trh、tlh及toxR基因为靶标实时荧光定量PCR检测,为病原体的定性定量检测提供了技术支持,保证了检测结果的可靠性和可比性.