靶向DEC-205的弓形虫SAG1 DNA疫苗的构建及鉴定

• 作者: 林霞琳 黄春芳 陈育琪 李丽娜 魏坤亚 陈欢 黄志坚 殷光文
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（下半月）
• 关键词: 弓形虫 DNA疫苗 SAG1抗原 树突状细胞 DEC-205单链抗体 重组质粒
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 72-75,80,159
• 页数: 6页
• 分类号: S852.72|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.12.0256

摘要

为了构建新型弓形虫DNA疫苗并鉴定,试验以弓形虫SAG1作为疫苗候选抗原,融合小鼠树突状细胞(DC)表面分子DEC-205的单链抗体(single chain antibody fragment against DEC-205,scFv DEC-205),构建可表达弓形虫速殖子的表面抗原SAG1和scFvDEC-205-SAG1的DNA质粒,对该质粒进行酶切鉴定,同时用该质粒对真核细胞进行转染,对目标蛋白的表达情况进行鉴定.结果 表明:经电泳、双酶切及测序证实目的基因大小与实际相符,重组质粒pVAX1-scFvDEC205-SAG1构建成功;经Western-blot和细胞免疫荧光试验证实重组质粒pVAX1-scFvDEC205-SAG1可成功表达目的蛋白.说明成功构建重组DNA疫苗pVAX1-scFvDEC 205-SAG1并在体外表达.