PCR-高分辨熔解曲线法在Kidd血型基因分型中的应用

• 作者: 章昊 林坤达 梁爽 苏宇清 洪文旭
• 来源期刊: 国际输血及血液学杂志
• 关键词: Kidd血型系统 基因型 基因分型技术 多态性，单核苷酸 高分辨率熔解曲线 基因分型 JK基因
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 78-83
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn511693-20200903-00195

摘要

目的:探讨PCR-高分辨熔解曲线(HRM)法在Kidd血型基因分型中的应用。方法:采用简单随机抽样法，选择2019年10月至11月，于深圳市血液中心参加无偿献血的256例献血者为研究对象。本组献血者年龄为18～60岁；男性献血者为142例，女性为114例。采用血型血清学试验方法对本组献血者全血标本的红细胞抗原表型进行检测。采用PCR-SSP和PCR-HRM法对本组献血者的DNA标本进行Kidd血型基因分型。对于基因分型与血型血清学检测结果不一致的标本，则通过 JK基因第9外显子直接测序法进行确认。本研究遵循的程序符合2013年修订版《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求，并且于献血前与所有献血者签署《献血者知情同意书》。 结果:①本组256例无偿献血者全血标本的血型血清学检测结果显示，Jk(a-b+)、Jk(a+b+)和Jk(a+b-)表型献血者分别为86、109和61例。②本组256例献血者基因组DNA标本的PCR-SSP和PCR-HRM法的Kidd血型基因分型结果一致， JKB/ JKB、 JKA/ JKB和 JKA/ JKA基因型献血者分别为82、115和59例。③ 22例(8.6%，22/256)献血者的血型血清学表型与基因分型结果不一致。其基因组DNA标本经 JK基因第9外显子直接测序结果显示， JK基因第9外显子存在c．838 G>A突变，与 JKA/ JKB基因分型结果相符。 结论:本研究建立的PCR-HRM法可准确进行Kidd血型基因分型，该方法可以有效地辅助Kidd血型精准鉴定。在进行Kidd血型鉴定的实际工作中，可联合血型血清学和PCR-HRM法，以提高Kidd血型鉴定准确度。