食品中单核细胞增生李斯特菌的重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

• 作者: 何洁 朱超 黄珊珊 吴巧维 孙萍 劳华均
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 关键词: 单核细胞增生李斯特菌 重组酶聚合酶扩增技术(RPA) hlyA 检测
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法|Experimental Technique and Method
• 页码范围: 274-278
• 页数: 5页
• 分类号: R155
• 语种: 中文
• DOI: 10.13590/j.cjfh.2021.03.006

摘要

目的 建立食品中单核细胞增生李斯特菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)检测体系.方法 针对单核细胞增生李斯特菌的特异性基因hlyA,筛选出一组特异性强且高效的引物,建立单核细胞增生李斯特菌的RPA检测体系,并进行特异性、灵敏度检测.结果 建立的RPA方法在37℃恒温反应仅需30 min,能够特异地检测单核细胞增生李斯特菌,最低模板浓度可低至0.5 ng/μL.人工染菌试验显示,该RPA体系可以有效扩增出每2.5g样品中人工染菌104 CFU样品中的单核细胞增生李斯特菌.结论 RPA等温扩增方法特异较强、灵敏度较高,具有操作简便、不需要昂贵仪器、常温进行扩增反应等优点,适用于现场检测以及在基层实验室推广应用.