快速检测单核细胞增生李斯特菌LAMP方法的建立

• 作者: 姚栋 宋克云 张如胜 欧新华
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 环介导等温扩增 单核细胞增生李斯特菌 溶血素基因
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 394-397
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 字数: 3157字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种检测单核细胞增生李斯特菌核酸的快速、特异的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法.方法:针对单核细胞增生李斯特菌的李斯特菌溶血素hlyA基因设计4条LAMP引物,在水浴箱内65 ℃保温约60 min,完成对单核细胞增生李斯特菌的扩增,扩增产物经肉眼、SYBR Green I染色和电泳鉴定.利用LAMP和PCR方法同时检测1株单核细胞增生李斯特菌和10株非单核细胞增生李斯特菌(对照组)来验证LAMP方法的特异性.用LAMP和PCR方法分别检测一系列稀释后的单核细胞增生李斯特菌菌液,比较两者的敏感性.结果:经肉眼、加染料和电泳均能观察到1株单核细胞增生李斯特菌LAMP扩增阳性反应,10株非单核细胞增生李斯特菌没有出现LAMP扩增.LAMP敏感度比PCR高,LAMP检测单核细胞增生李斯特菌的检测下限为3 cfu/ml,PCR检测下限>300 cfu/ml.LAMP检测速度比PCR更快,只需要60 min.结论:建立了一种检测单核细胞增生李斯特菌的快速、特异的LAMP方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	欧新华	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	42	155	7.0	8.0
2	张如胜	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	29	127	7.0	9.0
3	姚栋	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	15	48	5.0	6.0
4	宋克云	长沙市疾病预防控制中心微生物检验科	19	77	6.0	8.0