单核细胞增生性李斯特菌LAMP-浊度/荧光检测方法的建立

• 作者: 谈静惠 贺生芳 郝俊虎 郭澍强
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 环介导等温扩增 浊度 荧光 单核细胞增生性李斯特菌
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 48-52
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61|S851.347
• 字数: 3967字
• 语种: 中文

摘要

将环介导等温扩增技术(LAMP)分别与浊度信号检测系统(turbidimeter)和荧光信号检测系统(fluorescence)相结合,建立了LAMP-浊度/荧光单核细胞增生性李斯特菌检测方法.选择单核细胞增生性李斯特菌保守毒力基因iap序列,通过环介导等温扩增引物设计在线软件设计4条特异性引物,进行反应条件的优化,并对建立的LAMP的特异性和灵敏度进行评价分析.结果表明,构建的LAMP-浊度信号检测方法优化后的扩增温度为61℃,菌液最低检测浓度为22.1 CFU/mL,灵敏度是普通PCR扩增方法的10倍;LAMP-荧光信号检测方法优化后的扩增温度为64℃,菌液最低检测浓度为2.21 CFU/mL,灵敏度是普通PCR扩增方法的100倍;建立的两种LAMP方法的特异性良好,其中1株单核细胞增生性李斯特菌标准菌株和1株本试验分离保存的单核细胞增生性李斯特菌检测结果均为阳性,8株非单核细胞增生性李斯特菌检测结果均为阴性.利用两种LAMP方法对630份肉类及其制品、人工污染样品等进行检测,检出45个LAMP阳性,与国标法(GB)检测结果一致.结果表明,建立优化的单核细胞增生性李斯特菌LAMP-浊度/荧光检测方法具有快速、特异、灵敏等特点,特别适用于基层兽医、食品及口岸一线部门对单核细胞增生性李斯特菌快速筛查工作.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺生芳		3	0	0.0	0.0
2	郭澍强		3	0	0.0	0.0
3	谈静惠		3	0	0.0	0.0
4	郝俊虎		5	5	1.0	2.0