应用环介导等温扩增技术快速检测单核细胞增生李斯特菌的研究

• 作者: 周生 唐修君 唐梦君 张小燕 葛庆联 蒲俊华 高玉时
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 单核细胞增生李斯特菌 环介导等温扩增技术 hlyA基因
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 25-28
• 分类号: S852.619
• 字数: 3907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.09.015

摘要

目的建立环介导等温扩增技术快速检测单核细胞增生李斯特菌.方法根据单核细胞增生李斯特菌(LM)hlyA基因序列中的保守区域,采用在线引物设计软件Primer Explorer 4.0进行设计,获得一套特异性的环介导等温扩增(LAMP)引物,对单核细胞增生李斯特菌hlyA基因进行LAMP扩增,并与常规PCR方法进行比较.结果建立的LAMP方法能成功扩增出梯形条带,LAMP检测单核细胞增生李斯特菌纯培养物和人工染菌的灵敏度为5.44×102cfu/mL,而对照PCR检测的灵敏度为5.44×104cfu/mL.对10株细菌进行LAMP扩增,仅单核细胞增生李斯特菌得到阳性结果.从DNA提取到报告结果,耗时仅1h.结论 LAMP检测单核细胞增生李斯特菌灵敏度高,特异性强,耗时短,方法简便,有望发展成为快速检测食品中单核细胞增生李斯特菌的有效手段.