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BVDV、BRV和BCoV TaqMan三重RT-qPCR检测方法的建立
BVDV、BRV和BCoV TaqMan三重RT-qPCR检测方法的建立
作者:
孙亚杰
关平原
周伟光
徐晓静
希尼尼根
于景丽
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
牛病毒性腹泻病毒
牛轮状病毒
牛冠状病毒
TaqMan三重RT-qPCR
混合感染
摘要:
为建立牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛轮状病毒(BRV)和牛冠状病毒(BCoV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因序列设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,建立了同时检测上述3种病毒的TaqMan三重RT-qPCR方法.该方法仅对BVDV 5'-UTR、BRV NSP5和BCoV N基因扩增呈阳性,而对牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒、魏氏梭菌(A型、B型和D型)、多杀性巴氏杆菌(A型和B型)等犊牛腹泻相关病原扩增均呈阴性;最低检出限为10拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于2%.利用本研究建立的TaqMan三重RT-qPCR方法对29份临床样品进行检测,获得BVDV、BRV、BCoV的4种混合感染型,其中BVDV与BCoV的混合感染率最高(27.6%);与已有单重RT-qPCR方法比较,发现两种方法检测BVDV、BRV和BCoV的符合率分别为100%、96.5%、100%.结果表明,本研究建立的TaqMan三重RT-qPCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好、可行性高等优点,可为今后BVDV、BRV和BCoV共感染引起的牛腹泻性疾病的鉴别诊断和流行病学调查提供新技术手段.
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篇名
BVDV、BRV和BCoV TaqMan三重RT-qPCR检测方法的建立
来源期刊
中国动物检疫
学科
农学
关键词
牛病毒性腹泻病毒
牛轮状病毒
牛冠状病毒
TaqMan三重RT-qPCR
混合感染
年,卷(期)
2021,(3)
所属期刊栏目
技术支撑
研究方向
页码范围
99-106
页数
8页
分类号
S852.65
字数
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1005-944X.2021.03.020
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
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(132)
共引文献
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参考文献
(12)
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牛病毒性腹泻病毒
牛轮状病毒
牛冠状病毒
TaqMan三重RT-qPCR
混合感染
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国动物检疫
主办单位:
中国动物卫生与流行病学中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1005-944X
CN:
37-1246/S
开本:
16开
出版地:
青岛市南京路369号
邮发代号:
24-112
创刊时间:
1982
语种:
chi
出版文献量(篇)
8034
总下载数(次)
8
总被引数(次)
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