BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV四重荧光PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 姜利霞 王玉海 何世成 胡巧云 王卫国 鲁杏华 武维保 谢怡灵 王昌建
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 关键词: 多重荧光PCR 牛疱疹病毒1型 牛呼吸道合胞体病毒 牛副流感3型病毒 牛病毒性腹泻病毒
• 年，卷（期）: 2021,（10）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 98-106
• 页数: 9页
• 分类号: S854.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2021.10.020

摘要

为建立检测牛疱疹病毒(BHV-1)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)单一或混合感染的荧光PCR检测方法,根据BHV-1 gB基因、BRSV F基因、BPIV-3 M基因和BVDV 5'UTR基因保守区序列分别设计特异性引物和TaqMan荧光探针,经条件优化,成功建立了BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV的四重荧光PCR检测方法.该方法对牛布鲁氏菌、猪瘟病毒、小反刍兽疫病毒、羊多杀性巴氏杆菌无特异性扩增;对BHV-1、BPIV-3和BVDV的最低检测量均为8.268 copies/μL,对BRSV的最低检测量为82.680 copies/μL;该方法重复性好,CV值为1％～2％.应用本方法检测采自湖南省内某屠宰场的865份样品,结果BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV等4种病原均有检出,其阳性率分别为0.58％,0.81％,0.23％和0.81％.本研究建立的多重荧光PCR检测方法可同时对BHV-1、BRSV、BPIV-3和BVDV进行检测,为这4种病原的快速诊断和鉴别提供了技术支撑.