耐热β-甘露聚糖酶的异源表达及低聚寡糖制备研究

• 作者: 者园园 苗华彪 吴倩 慕跃林 黄遵锡
• 来源期刊: 饲料研究
• 学科: 农学
• 关键词: β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 克隆表达 酶学性质 甘露寡糖
• 年，卷（期）: 2021,（23）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 63-68
• 页数: 6页
• 分类号: S816
• 语种: 中文
• DOI: 10.13557/j.cnki.issn1002-2813.2021.23.014

摘要

研究从魔芋基地筛选产甘露聚糖酶菌株,并克隆甘露聚糖酶基因.设计兼并引物获得目的基因,通过电转化法至毕赤酵母GS115中实现异源表达,研究该重组酶的酶学特性.结果显示,重组甘露聚糖酶DL4man基因为1104 bp,蛋白分子量为41.5 kDa,糖苷水解酶26家族.最适反应pH值为5.5,最适反应温度为55℃,70℃下半衰期为70 min,80℃下耐受100 min后剩余46％的酶活,属于耐高温甘露聚糖酶,具有良好的胃-胰蛋白酶耐受性.酶解角豆胶的产物主要是聚合度为2、3、4、5的甘露寡糖.酶解魔芋粉的主要产物是聚合度为2、3的甘露寡糖.研究实现耐高温甘露聚糖酶在毕赤酵母GS115中的异源表达.研究表明,该酶酶解魔芋粉、角豆胶均能够生成甘露低聚糖,可为甘露低糖的制备提供参考.