鸡毒支原体VLHA3.03蛋白的原核表达及免疫原性分析

• 作者: 陈玥彤 祁晶晶 胡增金 赵宇馨 李浩然 刘晓涵 王少辉 田明星 郭伶 于圣青 周铁忠
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡毒支原体 VLHA 原核表达 免疫原性 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文|Research articles
• 页码范围: 134-141
• 页数: 8页
• 分类号: S858.31
• 语种: 中文

摘要

为研究鸡毒支原体(MG)的可变脂蛋白血凝素(VLHA)的生物学功能,对VLHA 3.03蛋白进行原核表达,然后进行了免疫原性和免疫反应性分析.通过Overlap PCR方法对MG Rlow株的vlha3.03基因进行点突变扩增,将突变成功的vlha3.03基因全长与原核表达载体pColdⅠ连接,连接产物转入大肠杆菌BL21进行诱导表达和纯化.用纯化后的重组蛋白rVLHA3.03免疫新西兰大白兔,制备兔多克隆抗体,并用ELISA检测抗体效价,再用制备的兔多克隆抗体、MG不同分离株阳性鸡血清及MS标准阳性血清分别与rVLHA3.03蛋白进行Western blot反应,分析rVLHA3.03蛋白的免疫原性和免疫反应性.结果表明,在大肠杆菌BL21中成功表达rVLHA3.03蛋白,且该蛋白具有较好的免疫原性和免疫反应性.