丙型肝炎病毒核心区基因的克隆，表达及抗原活性分析

• 作者: 张新芳 李益民
• 来源期刊: 生物制品年刊
• 学科: 医学
• 关键词: HCV核心基因 克隆 表达 免疫反应性 抗原活性
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 页码范围: 102
• 页数: 1页
• 分类号: R373.21

摘要

本文通过逆转录（RT）－聚合酶链式反应（PCR）从一份来自甘肃武威地区献血员HCV阳性血中扩增并克隆到573bp的HCV核心基因全自段，用T－A克隆载体法将此片段接入克隆载体pUC19中，进行核苷酸序列测定后发现，武威地区分离株与HCV I型株HCV－I和HCV－II型株HCV－Hebei在该基因区段的核苷酸／氨基酸序列同源性分别为89．6％／95．4％和97．3％／97．4％。利用原核高效表达载体pTrCHisA在大肠杆菌中有效地表达了带有6个组氨酸的C区融合蛋白，通过中和抑制ELISA和Western-blot对占菌体总蛋白15％以上的表达产物进行了鉴定，有Probond resin column对表达产物进行了亲和层析纯化，纯化产物用于检测HCV阴阳性血清标本，初步表明该抗原有很好的免疫反应性和特异性，与日本东燃公司C11抗原活性和特异性基本一致。