人白细胞介素-3突变体的构建及在大肠杆菌中表达的研究

• 作者: 万瑛 刘昕 朱锡华 王燕 纪贤文
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PCR定点突变 hIL-3 cDNA突变体 高水平表达 hIL-3突变体
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2068字
• 语种: 中文

摘要

目的:为了在大肠杆菌中高效表达hIL-3cDNA,获得hIL-3蛋白,拟对天然型hIL-3进行构建以获得新的突变体,同时进行了活性测定,以便深入了解hIL-3的结构与功能之间的关系.方法:利用PCR技术对天然型hIL-3 N末端第3位蛋氨酸(Met3)和C末端第17位蛋氨酸(Lys116)进行定点突变,获得突变体MhIL-3和MVhIL-3.结果:经Suger双脱氧法测序证实突变体 MhIL-3 cDNA,MVhIL-3 cDNA 的活性为6.9×104 U/ml,而天然型的是1.5×104 U/ml.天然型pSM53hNIL-3表达量占菌体总蛋白的7%,突变型pSM53MVhIL-3表达量占菌体总蛋白的16%.结论:人IL-3 cDNA可通过PCR技术进行定点突变,所获得的突变型pSM53 MVhIL-3活性比天然型pSM53hIL-3高3～4倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘昕	第三军医大学分子生物学教研室	39	295	9.0	15.0
2	朱锡华	第三军医大学分子免疫学教研室	50	252	7.0	13.0
3	万瑛	第三军医大学分子生物学教研室	57	283	10.0	14.0
4	王燕	第三军医大学分子生物学教研室	51	263	10.0	13.0
5	纪贤文	第三军医大学分子生物学教研室	3	3	1.0	1.0