抗胃癌鼠单抗3H11 Fab段载体的构建、表达及抗体活性检测

• 作者: 李竞 王卓智 王琰 董志伟
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体,单克隆 抗体,肿瘤 基因,免疫球蛋白 免疫球蛋白可变区Fab
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 所属期刊栏目: 基因工程抗体
• 页码范围: 158-161
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.1999.02.030

摘要

目的 构建和表达抗胃癌鼠单抗3H11的Fab段小分子抗体.方法 采用RT-PCR方法,利用第一骨架区通用引物扩增重链Fd段和κ链的基因,克隆到Fab表达载体中.并根据已克隆的3H11 VL的真实序列,重新设计κ链5'端引物,将骨架区引物在κ链5'端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列,再次构建Fab表达载体.结果 利用第一骨架区通用引物构建的Fab在大肠杆菌中获得了表达但未检测到抗原结合活性,将骨架区引物在κ链5'端所造成的氨基酸残基改变纠正为原始序列后,在大肠杆菌中表达出了可与抗原MGC803细胞结合的Fab段.结论 在构建小分子抗体时,PCR引物引入的氨基酸残基的改变可影响所表达抗体的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董志伟	中国医学科学院肿瘤研究所	24	344	10.0	18.0
2	李竞		3	21	3.0	3.0
6	王卓智	北京医科大学临床肿瘤学院	2	16	2.0	2.0
7	王琰		1	7	1.0	1.0