逆病毒载体介导双耐药基因在脐血CD34+细胞中的表达和抗性研究

• 作者: 卢大儒 夏学鸣 王季石 薛京伦 阮长耿 陈子兴
• 来源期刊: 实验生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 醛脱氢酶基因(ALDHl) 多药耐药基因(MDRl) 逆转录病毒载体 基因共表达 造血干细胞 基因疗法 脐血
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 页码范围: 341-348
• 页数: 8页
• 分类号: Q81
• 字数: 4765字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-520X.2000.04.008

摘要

为探讨转染醛脱氢酶基因(ALDHl)和多药耐药基因(MDRl)的人脐血CD34+细胞能否同时增强对活性环磷酰胺(4-HC)和MDRl基因靶药的抗性,构建了同时含ALDHl和MDRl双耐药基因的逆转录病毒表达质粒GlNa-ALDHl-IRES-MDRl,经LipofectAMINE介导转染GP+E86和PA317包装细胞,采用含长春新碱(VCR)和4-HC的培养基克隆选择后收集重组病毒上清于单向型GP+E86与双嗜型PA317包装细胞行乒乓交互感染,获得PA317重组病毒生产细胞(最高滴度达5.6×105CFU/ml),将含ALDHl和MDRl双耐药基因重组病毒的上清在细胞生长因子刺激下重复感染人脐血CD34+细胞,用PCR、RT-PCR、Southernblot、Northernblot、FACS和MTT等方法检测外源ALDHl与MDRl基因在CD34+细胞中的转移和表达.结果显示:逆转录病毒载体介导的双耐药基因已经整合人转染靶细胞基因组并获得有效表达,同时传递不同的耐药表型.经双耐药基因修饰的脐血CD34+细胞对4-HC和VCR药物同时产生抗性,其IC50值分别比未转染细胞高4倍和7.2倍,本研究为开展肿瘤基因治疗的临床研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢大儒	复旦大学遗传学研究所	137	982	17.0	25.0
2	阮长耿	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	29	275	8.0	16.0
3	薛京伦	复旦大学遗传学研究所	51	228	8.0	13.0
4	陈子兴	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	12	52	5.0	6.0
5	夏学鸣	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	4	7	1.0	2.0
6	王季石	江苏省血液研究所苏州医学院附一院血液科	2	5	1.0	2.0