人TRAIL在毕氏酵母表达系统中的表达

• 作者: 冯煜 娄永华 彭燕 朱玉平 焦炳华 王梁华
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: TRAIL 序列 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 基因工程抗体和单克隆抗体
• 页码范围: 420-424
• 页数: 5页
• 分类号: Q73
• 字数: 5121字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2000.05.027

摘要

目的在甲醇营养型酵母(Pichia)中,表达人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)分子.方法将可溶性TRAIL基因片段插入酵母表达载体pIC 3.5,经氯化锂转化酵母GS115,甲醇诱导表达,5 d后用SDS-PAGE和Western-blot进行分析,并用L929细胞测定其活性.结果在酵母细胞中表达的TRAIL,SDS-PAGE分析占总蛋白的50%以上.用抗人TRAIL多抗检测表明,表达的TRAIL分子,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的TRAIL明显提高,并能诱导几株肿瘤细胞DNA片段化,说明TRAIL可能已正确折叠并形成活性必须的高级结构.结论在Pichia系统中成功地表达人可溶性TRAIL分子,为研究其作用机制创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玉平	第二军医大学基础部卫生毒理学教研室	44	219	8.0	12.0
2	焦炳华	第二军医大学基础部卫生毒理学教研室	215	1714	20.0	33.0
3	王梁华	第二军医大学基础部卫生毒理学教研室	77	303	9.0	12.0
4	娄永华	第二军医大学基础部卫生毒理学教研室	36	203	8.0	12.0
5	冯煜	第二军医大学基础部卫生毒理学教研室	7	46	5.0	6.0
6	彭燕	第二军医大学基础部卫生毒理学教研室	2	12	2.0	2.0