重组人α-半乳糖苷酶A在巴氏毕赤酵母中的表达及鉴定

• 作者: 季守平 宫锋 徐莉娟 章扬培 高红伟
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 人α-半乳糖苷酶A 毕赤酵母 法布莱氏病
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 544-547
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 4300字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.06.012

摘要

目的:克隆人α-半乳糖苷酶A(α-GalA)cDNA,并在毕赤酵母中表达重组的人α-GalA.方法:利用RT-PCR方法从人肝癌细胞中克隆人α-半乳糖苷酶A cDNA并构建到可用甲醇诱导的分泌型巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαA 中.将重组质粒导入毕赤酵母并用Zeion抗生素筛选转化细胞.在甲醇诱导后,利用SDS-PAGE 、Western 印迹及酶活测定方法在酵母上清中鉴定重组的人α-GalA.结果:获得人α-GalA cDNA,构建酵母表达质粒pHGCZɑA,将重组表达载体导入到酵母细胞,并在上清中检测到人α-GalA蛋白.结论:获得了人α-GalA cDNA及具有生物活性的重组人α-GalA,为临床应用于法布莱氏病的治疗奠定了基础..

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章扬培	军事医学科学院野战输血研究所	98	679	13.0	20.0
2	宫锋	军事医学科学院野战输血研究所	47	194	7.0	11.0
3	季守平	军事医学科学院野战输血研究所	41	231	8.0	13.0
4	高红伟	军事医学科学院野战输血研究所	35	72	4.0	6.0
5	徐莉娟	军事医学科学院野战输血研究所	5	19	2.0	4.0