用PCR法从cDNA文库中快速克隆基因

• 作者: 刘建喜 李雪辉 林爱星 陈新荣 陈永福
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PCR 5'和3'cDNA末端 克隆 rsp10
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 279-281
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2001.03.019

摘要

以λgtll为载体,构建家兔睾丸文库.平板扩增6×105pfus,提取λDNA作为PCR模板.根据GenBank已发表spl0cDNA的同源序列,选择高度保守区域设计5'端引物(SP5'),另加与构建文库载体λgtll序列互补的正向(FP)或反向引物(RP)共同配对组成PCR循环引物.利用SP5'+Rp或SP5'+FP引物对扩增出sp10cDNA的3'端.根据3'端的测序结果,设计sp10的3'端引物(SP3'),利用SP3'+RP或SP3'+FP引物对扩增出sp10cDNA的5'端.应用该方法成功地克隆了家兔精子膜蛋白sp10cDNA(rsp10),说明该方法是一种快捷可行的cDNA克隆方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林爱星		24	135	6.0	11.0
2	刘建喜		7	66	4.0	7.0
3	陈永福		147	1482	21.0	31.0
4	陈新荣		2	56	2.0	2.0
5	李雪辉		2	48	1.0	2.0