HBV启动子调控的GFP在肿瘤细胞中的表达

• 作者: 徐枫 杜菲 杨树德 范云霞 茆灿泉 赵玫 黄常志
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 GFP HBV 转染
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: R730.43|Q784|Q959.13
• 字数: 2368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2001.01.017

摘要

目的:研究HBV启动子调控下的GFP报告基因在肿瘤细胞中的表达。方法:采用DNA重组技术，将GFPs65T和HBV的EⅡmCMV启动子（增强子）亚克隆到哺乳动物表达载体pcDNA3中，构建了pcDNA3-GFP，pcDNA3-GFP-EⅡ,pcDNA3-GFP-EⅡ-w3种含GFP的重组质粒，在Lipofectin介导下分别转染Hela和Bel7402肿瘤细胞，经G418抗性筛选，挑选阳性克隆并扩大培养用于荧光和Westernblotting检测，利用GELDoc2000数字成像系统对GFP蛋白表达进行定量分析。结果:酶切和电泳表明重组质粒构建正确;获得了稳定转染各质粒的阳性细胞克隆;经Westernblotting检测，亲本和空载细胞的GFP值在本底范围，GFP转染的各细胞，均可检测到27kD的GFP目的蛋白；EⅡmCMV启动子调控的Hela-GFP-EⅡ，Hela-GFP-EⅡ-w表达的GFP量均低于Hela-GFP；pcDNA3-GFP-EⅡ-w在Bel7402细胞中的表达量明显高于其在Hela细胞中的表达量。结论:HBV启动子调控下的GFP报告基因能够在肝癌Bel7402细胞中表达并具有一定的专一性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	茆灿泉	卫生部北京医院临检中心	3	41	2.0	3.0
2	黄常志	卫生部北京医院临检中心	2	8	2.0	2.0
3	杨树德	卫生部北京医院临检中心	3	41	2.0	3.0
4	赵玫	卫生部北京医院临检中心	2	8	2.0	2.0
5	范云霞	卫生部北京医院临检中心	2	8	2.0	2.0
6	徐枫	卫生部北京医院临检中心	2	8	2.0	2.0
7	杜菲	卫生部北京医院临检中心	2	8	2.0	2.0