将含纤维素酶E5基因的质粒pD541用Nco I 和EcoR I 双酶切后,经电泳分离获取含E5基因的小片段,将该片段定向插入表达质粒pSE420的多克隆位点上,进一步将重组DNA转入大肠杆菌宿主.采用刚果红染色法检测出选择性平板上的转化子具有羧甲基纤维素酶(CMCase)活性.摇瓶产酶试验进一步表明,基因重组后的大肠杆菌能高效表达E5基因并将产物分泌出胞外,培养液中可检测到的CMCase活力达31.6 U/mL.该研究结果为进一步构建高效纤维素分解菌株打下了良好的基础,具有重要的学术意义和实际应用价值.