人源抗HBsAg抗体Fd段和L链高效表达菌株的筛选

• 作者: 何玉先 刘顺爱 徐道振 王学 田波
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HBsAg 人源抗体Fab 高效表达
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 289-291
• 页数: 3页
• 分类号: R371.4
• 字数: 2458字
• 语种: 中文

摘要

目的：选用高效表达载体分别高效表达人源抗HBsAg抗体的Fd段和L链，经包涵体纯化和变性复性使Fd段和L链之间形成二硫键，最终制备有活性、高产量的人源抗HBsAg基因工程抗体Fab。方法：用PCR法从可溶性表达重组质粒抗HBsAg Fad Comb3扩增Fd段和L链后分别构建高效表达载体PQE32-Fd和PQE32-L，并分别导入大肠杆菌M15中进行表达，用SDS-PAGE筛选出高效表达克隆。结果：SDS-PAGE筛选的高效表达克隆M15-PQE32-Fd和M15-PQE32-L经IPTG诱导后以包涵体形式表达，其表达量很高。从高效表达克隆重新扩增Fd段和L链后进行测序鉴定发现所得的序列与已报道的抗HBsAg抗体Fab基因吻合率为97％。结论：虽然已有表达可溶性人源抗HBsAg基因工程抗体Fab的报道，但因其表达量低而不能实际应用。筛选出高效表达人源抗HBsAg抗体Fd段和L链的克隆，因为包涵体形式表达需经变性复性，虽然变性复性后其产量会受影响，但因表达量很高，所以还是有很高的实际应用价值。其包涵体变性复性条件仍需进一步探讨。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐道振		72	1273	18.0	34.0
2	刘顺爱		19	162	8.0	12.0
3	田波	中国科学院微生物研究所	70	951	16.0	29.0
4	王学	中国科学院微生物研究所	15	193	8.0	13.0
5	何玉先		2	2	1.0	1.0