嵌合轻链为模板导向筛选人源性抗肝癌抗体重链Fd片段

• 作者: 包国强 杨向民 邢金良 陈志南 马庆久
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体库 肝癌 导向筛选
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4103字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2004.03.002

摘要

目的:利用噬菌体抗体库和导向选择技术,以抗HAb18G嵌合抗体轻链为模板,筛选人源性抗肝癌抗体Fd片段.方法:利用RT-PCR自肝癌患者外周血淋巴细胞中扩增全套人抗体重链Fd基因片段,克隆入含嵌合L链的展示载体pComb3X,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库.然后,利用大肠杆菌表达的非融合HAb18GE为抗原进行亲和筛选,利用pⅢ融合抗体的形式进行克隆鉴定,并对筛选出的杂合抗体进行初步的功能检测.结果:构建成功库容量为2×107PFU的杂合人-鼠噬菌体抗体库,利用非融合表达的HAb18GE进行6轮筛选.ELISA及流式细胞仪检测,其中7个克隆呈特异性阳性反应.其中克隆AP6-2和AP6-7亲和力较高,测序显示其基因序列相同,且与亲本抗体恒定区序列相同,属IgG2亚类,可变区属VH3家族.结论:通过本实验,利用嵌合轻链为模板,进行Fd片段替换,成功筛选到人源性抗体Fd片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志南	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	114	603	12.0	18.0
2	邢金良	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	35	135	8.0	9.0
3	包国强	第四军医大学唐都医院普通外科	52	295	9.0	14.0
4	马庆久	第四军医大学唐都医院普通外科	158	1210	18.0	25.0
5	杨向民	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	25	102	6.0	8.0