可溶性嵌合补体抑制分子的构建及表达

• 作者: 姜曼 张晓平 白云 黎万玲
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD46/CD55/CD59 PCR 嵌合分子 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 426-429
• 页数: 4页
• 分类号: R392.4
• 字数: 3296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2002.06.006

摘要

目的制备能抑制补体活化的2个关键环节(C3/C5转化酶和MAC的形成)的一种新型、高效补体抑制剂.方法先设计引物,然后通过PCR技术扩增重组可溶性CD46/CD55/CD59嵌合分子cDNA片段,重组于pSecTagA真核表达载体上,分别利用COS-7细胞和中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞进行表达,并用抗人CD46多克隆抗体及抗人CD55、CD59单克隆抗体对表达产物进行westem blotting鉴定.结果 DNA测序证实,前端带有小鼠IgGk链前导序列,后端融合有编码6个组氨酸碱基的CD46/CD55/CD59嵌合分子cDNA片段的阅读框完整.免疫印迹结果显示,表达的重组蛋白分别能与抗入CD46多克隆抗体和抗人CD55、CD59单克隆抗体结合.结论成功构建并在真核细胞内表达了重组可溶性CD46/CD55/CD59嵌合分子,为进一步研制和开发新一代多功能、多靶点补体抑制剂奠定了基础.