sIL-16在大肠杆菌中的表达及活性分析

• 作者: 何凤田 叶治家 巩艳 彭家和 曹廷兵 甘立霞
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: sIL-16 表达 纯化 活性
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 318-321,355
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2002.04.009

摘要

用PCR法扩增本室保存的sIL16 cDNA片段,插入含T7启动子的表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET-sIL16,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温经IPTG诱导蛋白表达,过Ni2+螯和层析柱一步纯化表达蛋白,重组蛋白与Jurkat细胞共同孵育后,观察它对细胞表面IL-2R表达的影响,结果发现IPTG诱导蛋白表达后,经SDS-PAGE电泳,可以看到在18 kD左右出现明显蛋白表达条带,表达量占菌体可溶蛋白的40%左右,纯化蛋白的纯度达90%以上,经重组蛋白处理过的Jurkat细胞表面IL-2R的表达水平比未经它处理的细胞增高了18.54%.