IRES序列连接的D-氨基酸氧化酶与绿色荧光蛋白基因导入K562e细胞的表达

• 作者: 吕书晴 周虹 张雨生 王健民 翟勇平
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: D-氨基酸氧化酶基因 IRES序列 绿色荧光蛋白基因 基因转移 K562e细胞系
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 209-211
• 页数: 3页
• 分类号: Q786|R733.7
• 字数: 1765字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2002.03.008

摘要

内部核糖体进入位点(IRES)序列来源于脑心肌炎病毒,它可翻译一条mRNA上的两个开放读框,由其连接的两个基因的表达率相同.本实验应用以IRES序列连接D-氨基酸氧化酶(DAAO)和绿色荧光(GFP)基因构建的逆转录病毒载体,转染K562e细胞获得稳定表达GFP的单克隆细胞KDIGC和KDfGd,测定转基因细胞的荧光阳性率以及荧光强度,用D-丙氨酸(D-Ala)作用DAAO+细胞,并用酚红氧化法测定培养上清H2O2.结果表明,KDfGC和KDfaGD细胞的荧光阳性率分别为94.64%,96.31%;2×104细胞的荧光强度分别为202 U和174 U.GFP荧光强度与H2O2的产量间呈指数相关.结论:IRES序列调控的双基因可同时表达,GFP的荧光强度可以间接地反映DAAO基因的表达水平,为了解目的基因表达水平高低提供了新的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王健民	第二军医大学附属长海医院血液科	194	921	13.0	22.0
2	周虹	第二军医大学附属长海医院血液科	52	314	8.0	15.0
3	翟勇平	南京军区南京总医院血液科	56	176	8.0	10.0
4	吕书晴	第二军医大学附属长海医院血液科	50	173	7.0	10.0
5	张雨生	第二军医大学附属长海医院血液科	9	28	3.0	5.0