恶性疟原虫Pf332基因片段的克隆及表达

• 作者: 余新炳 单志新 卞国武 吴忠道 徐劲 马长玲
• 来源期刊: 中山医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 疟原虫,恶性 抗原,Pf332 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: R382.3
• 字数: 2953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2002.01.004

摘要

[目的] 构建含恶性疟原虫Pf332抗原基因片段的重组质粒,并检测在大肠杆菌BL21/DE3中的表达情况.[方法] 应用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增Pf332基因(Pf332)片段,P332-R0、P332-R1、P332-R2,并分别插入pGEX-4T-1原核表达载体,阳性克隆的重组质粒DNA经酶切及PCR扩增鉴定.用DNAstar软件对FCC1/HN株与3D7株Pf332的P332-R1、P332-R2片段进行同源性比较.由IPTG诱导在大肠杆菌BL21/DE3中表达重组蛋白.[结果] PCR扩增得到特异的FCC1/HN株Pf332片段,P332-R0、P332-R1、P332-R2,大小分别为489、429和393 bp.酶切及PCR鉴定获得了正确的pGEX-P332-R0、pGEX-P332-R1、pGEX-P332-R2重组质粒.序列分析结果显示,与3D7株相比,FCC1/HN株P332-R1、P332-R2片段编码多肽分别缺少2、4个相应的重复单元.在大肠杆菌BL21/DE3中表达出3个重组蛋白,相对分子质量分别为46、44和42.[结论] 扩增、克隆了恶性疟原虫Pf332片段,P332-R0、P332-R1、P332-R2,并在大肠杆菌BL21/DE3中成功表达.FCC1/HN株与3D7株的P332-R1、P332-R2片段编码多肽所包含的重复单元数目不同.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	单志新	中山医科大学寄生虫学教研室	21	56	5.0	7.0
2	余新炳	中山医科大学寄生虫学教研室	101	467	11.0	17.0
3	马长玲	中山医科大学寄生虫学教研室	24	40	4.0	6.0
4	徐劲	中山医科大学寄生虫学教研室	29	99	6.0	9.0
5	吴忠道	中山医科大学寄生虫学教研室	57	292	9.0	14.0
6	卞国武	中山医科大学寄生虫学教研室	14	71	6.0	8.0