相思豆毒蛋白-a A 链在大肠杆菌中的表达及体外生物活性的测定

• 作者: 卿柳庭 屈小玲
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 相思豆毒蛋白-a A 链(ABRaA) 核糖体失活蛋白 克隆和表达 蛋白质生物合成抑制 N-糖苷酶活性
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 405-410
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

用RT-PCR方法克隆了相思豆毒蛋白-a A 链(ABRaA)的cDNA编码序列, 并将其重组到原核表达质粒pET28b中. 成熟的ABRaA在大肠杆菌中得到高效表达, 可溶性重组蛋白质的获得率达4 mg/L培养物, 而且具有较好的纯度. 重组蛋白质体外生物活性的测定结果表明, 其对兔网织红细胞裂解液的体外蛋白质生物合成具有较强的抑制作用, IC50为0.08 nmol/L, 与天然ABRaA的(0.06 nmol/L)相差不大; 重组ABRaA蛋白表现出较强的N-糖苷酶活性, 其可切割大鼠肝脏核糖体28 S rRNA的A4324位点, 释放出一条约420 nt的小片段RNA. 这些结果提示重组的ABRaA具有有效的生物活性, 可以作为一种潜在的肿瘤化疗药物而用于制备免疫毒素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卿柳庭	华中农业大学动物科学学院	14	67	6.0	8.0
2	屈小玲	武汉大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0