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摘要:
用RT-PCR方法克隆了相思豆毒蛋白-a A 链(ABRaA)的cDNA编码序列, 并将其重组到原核表达质粒pET28b中. 成熟的ABRaA在大肠杆菌中得到高效表达, 可溶性重组蛋白质的获得率达4 mg/L培养物, 而且具有较好的纯度. 重组蛋白质体外生物活性的测定结果表明, 其对兔网织红细胞裂解液的体外蛋白质生物合成具有较强的抑制作用, IC50为0.08 nmol/L, 与天然ABRaA的(0.06 nmol/L)相差不大; 重组ABRaA蛋白表现出较强的N-糖苷酶活性, 其可切割大鼠肝脏核糖体28 S rRNA的A4324位点, 释放出一条约420 nt的小片段RNA. 这些结果提示重组的ABRaA具有有效的生物活性, 可以作为一种潜在的肿瘤化疗药物而用于制备免疫毒素.
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内容分析
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文献信息
篇名 相思豆毒蛋白-a A 链在大肠杆菌中的表达及体外生物活性的测定
来源期刊 生物化学与生物物理学报 学科 生物学
关键词 相思豆毒蛋白-a A 链(ABRaA) 核糖体失活蛋白 克隆和表达 蛋白质生物合成抑制 N-糖苷酶活性
年,卷(期) 2002,(4) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 405-410
页数 6页 分类号 Q5
字数 语种 英文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 卿柳庭 华中农业大学动物科学学院 14 67 6.0 8.0
2 屈小玲 武汉大学生命科学学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
相思豆毒蛋白-a A 链(ABRaA)
核糖体失活蛋白
克隆和表达
蛋白质生物合成抑制
N-糖苷酶活性
研究起点
研究来源
研究分支
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期刊影响力
生物化学与生物物理学报(英文版)
月刊
1672-9145
31-1940/Q
16开
上海市岳阳路319号31-B
4-210
1961
eng
出版文献量(篇)
3098
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