人微小病毒B19 VP1基因原核表达克隆的构建

• 作者: 丁守怡 于红 张文卿 王斌 王海青
• 来源期刊: 青岛大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细小病毒B19,人 基因,VP1 原核表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 117-120
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 3353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4488.2002.02.033

摘要

①目的构建人微小病毒B19 VP1基因的原核高效表达系统.②方法通过PCR扩增B19病毒主要抗原决定簇 VP1区段基因,将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2 上,IPTG诱导表达融合蛋白 ,产物经亲和层析初步纯化,以Western-Blot进行鉴定,并包被ELISA板,对临床血清进行检测.③结果 pGEX-4T-2-VP1可在大肠杆菌中高效表达,表达产物经纯化后可得单一目的蛋白条带.ELISA结果表明,其灵敏度、特异度等指标与德国Vir ion试剂盒有较好的符合率.④结论该重组蛋白具有良好的抗原性,为研制和开发具有我国独立知识产权的B19病毒基因工程抗原ELISA 诊断试剂盒提供了有价值的资料.