人DNA聚合酶β全长cDNA的克隆、鉴定及真核表达载体的构建

• 作者: 何云 庄志雄 徐雷 杜柳涛 杨杏芬 高昆 魏青
• 来源期刊: 中山医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA聚合酶β 聚合酶链反应 DNA,重组
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 187-189
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1897字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2002.03.008

摘要

[目的]克隆人类DNA聚合酶(pol-β)基因全长cDNA,构建该基因的真核高效表达载体.[方法]抽提人胚肺纤维细胞HLF总RNA进行RT-PCR扩增,用pGEM-T载体经T/A克隆、DNA测序确定后,用双酶切将pol-β全长cDNA定向克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1,转染大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定重组质粒.[结果]经RT-PCR获得1.03 kb的产物,经DNA测序,确定所扩增片段为人类pol-β基因全长cDNA,进而成功筛选出真核表达载体pEGFP-C1-β.[结论]成功构建人pol-β基因全长cDNA真核表达载体,为进一步建立该基因的高表达细胞株提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏青	中山大学公共卫生学院卫生毒理教研室	61	317	9.0	16.0
2	杨杏芬		153	947	14.0	22.0
3	何云	中山大学公共卫生学院卫生毒理教研室	61	881	12.0	29.0
4	徐雷	中山大学公共卫生学院卫生毒理教研室	26	178	9.0	12.0
5	杜柳涛	中山大学公共卫生学院卫生毒理教研室	10	135	5.0	10.0
6	高昆	中山大学生命科学学院	4	67	3.0	4.0