人FasL全长cDNA的克隆及其真核表达载体的构建

• 作者: 于波 安萍 李世拥 蔡慧芸 魏家臣
• 来源期刊: 外科理论与实践
• 学科: 生物学
• 关键词: FasL基因 克隆 序列分析 载体构建
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 397-399
• 页数: 3页
• 分类号: Q785
• 字数: 1961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9610.2003.05.011

摘要

目的:克隆人FasL全长cDNA并构建其真核表达载体.方法:采用RT-PCR法从健康人外周血单核细胞中扩增包含全部阅读框架的FasL全长cDNA,将之与pGEM-T Easy质粒连接、测序.构建pcDNA3.1-FasL真核表达载体,用脂质体介导方法转染人直肠癌8348细胞,检测FasL表达情况.结果:RT-PCR扩增的FasL产物经限制性内切酶酶切后生成的片段符合预期大小.克隆测序证实所得的FasL cDNA序列与Gene Bank序列完全一致.pcDNA3.1-FasL重组质粒经EcoRI+XhoI双酶切后,电泳显示898 bp目的片段和pcDNA3.1载体片段,证明重组质粒正确.转染直肠癌8348细胞后,用RT-PCR方法检测FasL表达阳性.结论:采用RT-PCR方法成功克隆了人FasL全长cDNA并构建了其真核表达载体,为进一步研究FasL功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李世拥	中国人民解放军北京军区总医院普通外科	10	87	6.0	9.0
2	于波	中国人民解放军北京军区总医院普通外科	9	39	3.0	6.0
3	安萍	中国人民解放军北京军区总医院普通外科	2	18	2.0	2.0
4	魏家臣	中国人民解放军北京军区总医院普通外科	1	3	1.0	1.0
5	蔡慧芸	中国人民解放军北京军区总医院普通外科	1	3	1.0	1.0