菠菜胆碱单氧化酶(CMO)基因的克隆及在大肠杆菌中的诱导表达

• 作者: M.K.Mahedrappa Yill Sung Park 王沙生 申晓辉 蒋湘宁 陆海
• 来源期刊: 北京林业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 胆碱单氧化酶 克隆 诱导表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: Q554
• 字数: 2316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1522.2003.01.002

摘要

甘氨酸甜菜碱是一种非毒性的渗透调节物质,在植物体内是以胆碱为底物,经两步氧化而合成的.菠菜中,催化第一步反应的酶为胆碱单氧化酶(Choline Monooxygenase,CMO).为了研究胆碱单氧化酶基因的功能以及转基因植物的抗逆能力,在300 mmol/L高盐浓度(n(NaCl):n(CaCl2)=5.7:1)的条件下,作者分离纯化了菠菜mRNA,经RT-PCR得到全长(1.3kb)胆碱单氧化酶(CMO)cDNA,与已经报道的基因序列相比较,同源性为99%.根据其核苷酸序列推导得到了氨基酸序列.将PCR纯化产物与pET-30a+连接,构建了重组表达载体pETCMO,并转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆海	北京林业大学生物科学与技术学院	69	729	14.0	24.0
2	蒋湘宁	北京林业大学生物科学与技术学院	70	1434	21.0	36.0
3	王沙生	北京林业大学生物科学与技术学院	28	926	17.0	28.0
4	申晓辉	北京林业大学生物科学与技术学院	1	15	1.0	1.0
5	Yill Sung Park		1	15	1.0	1.0
6	M.K.Mahedrappa		1	15	1.0	1.0