抗NI-35重组单链抗体表达载体的构建与融合表达

• 作者: 公茂青 吴安华 孙涛 王勇 王运杰
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗NI-35重组单链抗体 基因合成 表达
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 398-400,425
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 2694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2003.05.006

摘要

目的:重新设计并人工合成抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-scFv)的cDNA克隆,构建其表达载体,在原核系统中实现初步表达.方法:根据抗NI-35抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的基因片段,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到克隆载体pUC-18中,经全自动序列分析仪测序证实,再亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导表达.结果:合成的基因序列与设计的仅差一个碱基,目的基因连接方向及阅读框架正确;SDS-PAGE检测显示,表达出相对分子量31kDa的融合蛋白,并得到了良好的生物活性.结论:抗NI-35重组单链抗体基因表达载体的构建和表达,为深入研究其应用于神经系统的损伤和修复奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勇	中国医科大学附属第一医院神经外科	174	670	13.0	17.0
2	王运杰	中国医科大学附属第一医院神经外科	252	877	12.0	16.0
3	吴安华	中国医科大学附属第一医院神经外科	63	152	6.0	8.0
4	公茂青	中国医科大学附属第一医院神经外科	12	16	2.0	3.0
5	孙涛	中国医科大学附属第一医院神经外科	21	52	5.0	6.0