鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备

• 作者: 丁忠庆 乌尼 刘胜旺 孔宪刚 萨仁高娃
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸡IL-2融合蛋白 表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 412-416
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4281字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2003.04.017

摘要

将编码鸡(Gallus gallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)原核表达载体pPROEXTM HT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定.然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5 α并用IPTG于37℃诱导培养.SDS-PAGE和Western blot分析显示,表达的鸡IL-2融合蛋白分子量约为19 kD.融合蛋白经薄层扫描发现目的蛋白表达量约占菌体蛋白的30%.包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化.用所获得的重组鸡IL-2融合蛋白及其纯化产物免疫家兔,制备兔抗鸡IL-2多克隆抗血清,并用琼脂扩散实验对多克隆抗血清进行鉴定,表明其与纯化的重组鸡IL-2蛋白具有良好的反应性,而且该反应是特异的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乌尼	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	27	249	9.0	15.0
2	刘胜旺	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	53	724	15.0	25.0
3	孔宪刚	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	49	711	13.0	25.0
4	萨仁高娃	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	7	14	2.0	3.0
5	丁忠庆	东北农业大学动物医学院	4	36	4.0	4.0