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摘要:
[目的]克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a(+ )-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并对其进行鉴定.[方法]以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a(+ )-NrfA表达载体;经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白;再免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,Western Blotting检测抗体的特异性.[结果]构建的表达载体pET-28a(+)-NrfA在大肠杆菌中诱导后可高效表达NrfA蛋白;免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测,其效价为1∶204 900;经Western Blotting分析,抗体的特异性较好.[结论]成功克隆大肠杆菌的NrfA基因,并构建了其表达载体,制备的NrfA多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性,为研究细菌有关NrfA奠定了基础.
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文献信息
篇名 大肠杆菌NrfA蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备
来源期刊 安徽农业科学 学科 农学
关键词 NrfA基因 原核表达 多克隆抗体
年,卷(期) 2012,(10) 所属期刊栏目 生物技术
研究方向 页码范围 5786-5788
页数 分类号 S312|Q936
字数 2664字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.10.024
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 龚钢明 上海应用技术学院生物工程系 42 542 11.0 23.0
2 何婷婷 上海师范大学生命与环境科学学院 5 56 3.0 5.0
3 高然 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所 3 2 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
NrfA基因
原核表达
多克隆抗体
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
安徽农业科学
半月刊
0517-6611
34-1076/S
大16开
安徽省合肥市农科南路40号
26-20
1961
chi
出版文献量(篇)
78281
总下载数(次)
236
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