大肠杆菌NrfA蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 何婷婷 高然 龚钢明
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: NrfA基因 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 5786-5788
• 分类号: S312|Q936
• 字数: 2664字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2012.10.024

摘要

[目的]克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a(+ )-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并对其进行鉴定.[方法]以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a(+ )-NrfA表达载体；经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白；再免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,Western Blotting检测抗体的特异性.[结果]构建的表达载体pET-28a(+)-NrfA在大肠杆菌中诱导后可高效表达NrfA蛋白；免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测,其效价为1∶204 900;经Western Blotting分析,抗体的特异性较好.[结论]成功克隆大肠杆菌的NrfA基因,并构建了其表达载体,制备的NrfA多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性,为研究细菌有关NrfA奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚钢明	上海应用技术学院生物工程系	42	542	11.0	23.0
2	何婷婷	上海师范大学生命与环境科学学院	5	56	3.0	5.0
3	高然	浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所	3	2	1.0	1.0